Κιτ ανίχνευσης αντιγόνου SARS-CoV-2 (ανοσοχρωματογραφία λατέξ)

Κιτ ανίχνευσης αντιγόνου SARS-CoV-2 (ανοσοχρωματογραφία λατέξ)

Οδηγίες χρήσης
Το κιτ ανίχνευσης αντιγόνου SARS-CoV-2 (ανοσοχρωματογραφία λατέξ) είναι μια ανοσοδοκιμασία πλευρικής ροής που προορίζεται για την ποιοτική ανίχνευση νουκλεοπρωτεΐνης από ρινικά επιχρίσματα SARS-CoV-2, φαρυγγικά επιχρίσματα, πτύελα, βρογχοκυψελιδικό υγρό. Χρησιμοποιείται από επαγγελματίες ως τεστ και παρέχει ένα προκαταρκτικό αποτέλεσμα δοκιμής για να βοηθήσει στη διάγνωση λοίμωξης σε άτομα ύποπτα για COVID-19.
Αυτή η δοκιμή παρέχεται μόνο για χρήση από κλινικά εργαστήρια ή σε εργαζόμενους στον τομέα της υγειονομικής περίθαλψης για δοκιμές στο σημείο της φροντίδας και όχι για κατ' οίκον δοκιμή.
Τα αποτελέσματα από τις δοκιμές αντιγόνου δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται ως η μοναδική βάση για τη διάγνωση ή τον αποκλεισμό της λοίμωξης SARS-CoV-2 ή για την ενημέρωση της κατάστασης μόλυνσης. Η διάγνωση θα πρέπει να επιβεβαιώνεται σε συνδυασμό με κλινικά συμπτώματα ή άλλες συμβατικές μεθόδους εξέτασης.

Περίληψη και Εξήγηση του Τεστ
Οι νέοι κοροναϊοί ανήκουν στο γένος β. Το COVID-19 είναι μια οξεία λοιμώδης νόσος του αναπνευστικού. Οι άνθρωποι είναι γενικά επιρρεπείς. Επί του παρόντος, οι ασθενείς που έχουν μολυνθεί από τον νέο κορωνοϊό είναι η κύρια πηγή μόλυνσης· τα ασυμπτωματικά μολυσμένα άτομα μπορεί επίσης να είναι λοιμώδης πηγή. Με βάση την τρέχουσα επιδημιολογική έρευνα, η περίοδος επώασης είναι 1 έως 14 ημέρες, κυρίως 3 έως 7 ημέρες. Οι κύριες εκδηλώσεις περιλαμβάνουν πυρετό, κόπωση και ξηρό βήχα. Ρινική συμφόρηση, ρινική καταρροή, πονόλαιμος, μυαλγία και διάρροια εντοπίζονται σε λίγες περιπτώσεις.
Η ανίχνευση αντιγόνου είναι μια κοινή μέθοδος για τη διάγνωση της λοίμωξης από τον νέο κορωνοϊό. Αυτό το τεστ είναι ένα ανοσολογικό διαγνωστικό τεστ που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση του αντιγόνου νουκλεοπρωτεΐνης SARS-CoV-2 με βάση τη δοκιμασία ανοσοχρωματογραφίας Latex. Αυτή η μέθοδος είναι γρήγορη και βολική στη χρήση και απαιτεί λίγο εξοπλισμό. Μπορεί να εκτελεστεί μέσα σε 15-20 λεπτά από ελάχιστα εξειδικευμένο προσωπικό.

Αρχή δοκιμής
Αυτό το κιτ υιοθετεί τη δοκιμασία ανοσοχρωματογραφίας Latex.
Η κάρτα δοκιμής περιέχει:
1. Σύμπλεγμα μονοκλωνικού αντισώματος νουκλεοπρωτεΐνης ποντικού και αντισώματος ελέγχου ποιότητας επισημασμένο με μικροσφαίρες λατέξ.
2. Μεμβράνες νιτροκυτταρίνης ακινητοποιημένες με δοκιμαστικές γραμμές (γραμμή Τ) και μία γραμμή ποιοτικού ελέγχου (γραμμή C).
Όταν μια κατάλληλη ποσότητα δείγματος προστεθεί στο φρεάτιο δείγματος της δοκιμαστικής κάρτας, το δείγμα θα κινηθεί προς τα εμπρός κατά μήκος της κάρτας δοκιμής υπό τριχοειδική δράση.
Εάν το δείγμα περιέχει ένα αντιγόνο του SARS-CoV-2, το αντιγόνο θα συνδεθεί με τις μικροσφαίρες λατέξ που φέρουν το αντίσωμα SARS-CoV-2 και το ανοσοποιητικό σύμπλεγμα θα συλληφθεί από το μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο αντίσωμα ακινητοποιημένο στη μεμβράνη νιτροκυτταρίνης για να σχηματιστεί μια κόκκινη γραμμή, που δείχνει ότι το δείγμα είναι θετικό για αντιγόνο.

Αντιδραστήρια δοκιμής
Ο ονομαστικός τύπος για κάθε μέσο έχει ως εξής:

Αντιδραστήρια και υλικά που παρέχονται
Παρεχόμενα Υλικά:

Σημείωση: Μία συσκευή μιας χρήσης περιέχει ένα στυλεό και 0,5 ml δείγματος αραιωτικού.
Προδιαγραφές: 1T/κιβώτιο,20T/κιβώτιο,25T/κουτί,50T/κουτί,100T/κουτί

Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται
1.ΜΑΠ όπως γάντια, μάσκες, παλτό εργαστηρίου και προστασία ματιών
2.Δοχείο απορριμμάτων βιολογικού κινδύνου
3.Στήριγμα σωλήνα

Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις
1. Για έκτακτη ανάγκη και χρήση από ιατρούς ή επαγγελματίες υγείας μόνο σε καθορισμένα σημεία των εγκαταστάσεων περίθαλψης.
2. Διαβάστε ολόκληρο το ένθετο συσκευασίας πριν εκτελέσετε τη δοκιμή. Η μη τήρηση των οδηγιών του ένθετου συσκευασίας μπορεί να οδηγήσει σε μη έγκυρο αποτέλεσμα δοκιμής.
3. Φοράτε κατάλληλη προστατευτική ενδυμασία κατά το χειρισμό και την επεξεργασία δειγμάτων. Πλύνετε καλά τα χέρια μετά το χειρισμό του δείγματος.
4. Χειριστείτε τα δείγματα σαν να περιέχουν μολυσματικούς παράγοντες σύμφωνα με τις τυποποιημένες διαδικασίες και τις καθολικές προφυλάξεις του CDC των ΗΠΑ.
5. Μην το χρησιμοποιείτε εάν ο σωλήνας/το σακουλάκι είναι κατεστραμμένο ή σπασμένο.
6. Η δοκιμή είναι μόνο για μία χρήση. Μην επαναχρησιμοποιείτε σε καμία περίπτωση.
7. Η υγρασία και η θερμοκρασία μπορεί να επηρεάσουν αρνητικά τα αποτελέσματα.
8. Ακολουθήστε τις συστάσεις αποθήκευσης που αναγράφονται στις ετικέτες του προϊόντος. Η αποθήκευση και ο χειρισμός εκτός αυτών των συνθηκών μπορεί να επηρεάσει αρνητικά το προϊόν.
9. Μη χρησιμοποιείτε το προϊόν μετά την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης.
10. Απορρίψτε όλα τα δείγματα και τα χρησιμοποιημένα εξαρτήματα δοκιμής σε κατάλληλα εγκεκριμένα και επισημασμένα δοχεία απορριμμάτων βιολογικού κινδύνου.

Διάρκεια ζωής και αποθήκευση
1. Η αρχική συσκευασία πρέπει να φυλάσσεται σε ξηρό μέρος στους 2-30°C και προστατευμένο από το φως.
2. Η διάρκεια ζωής του κιτ δοκιμής είναι 1 έτος από την ημερομηνία κατασκευής. Ανατρέξτε στις ετικέτες των προϊόντων για τη δηλωμένη ημερομηνία λήξης.
3. Μετά το άνοιγμα της εσωτερικής συσκευασίας, η δοκιμαστική κάρτα θα καταστεί άκυρη λόγω απορρόφησης υγρασίας, χρησιμοποιήστε την εντός 1 ώρας.
4. Η αρχική συσκευασία πρέπει να μεταφερθεί στους 2-37℃ για 20 ημέρες.

Συλλογή και χειρισμός δειγμάτων
Αυτή η δοκιμή μπορεί να πραγματοποιηθεί με τη χρήση δειγμάτων ανθρωπίνων ρινικών επιχρισμάτων, φαρυγγικών επιχρισμάτων, πτυέλων, βρογχοκυψελιδικών, πλύσης, υγρών κ.λπ. Τα δείγματα μπορούν να συλλεχθούν χρησιμοποιώντας συστατικά που παρέχονται με το τεστ και θα πρέπει να ελέγχονται αμέσως. Δείτε το διάγραμμα στην ενότητα Διαδικασία δοκιμής.

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΕΞΕΤΑΣΗΣ
1. Ανοίξτε το κουτί συσκευασίας, βγάλτε την εσωτερική συσκευασία και αφήστε το να εξισορροπηθεί σε θερμοκρασία δωματίου.
2. Αφαιρέστε την κάρτα δοκιμής από τη σφραγισμένη θήκη και χρησιμοποιήστε την εντός 1 ώρας μετά το άνοιγμα.
3. Τοποθετήστε την κάρτα δοκιμής σε μια καθαρή και επίπεδη επιφάνεια.

①Δείγμα από ρινικά επιχρίσματα SARS-CoV-2, φαρυγγικά επιχρίσματα, πτύελα, βρογχοκυψελιδικά, υγρό έκπλυσης.	②Ρίξτε 500 ul (περίπου 9-10 σταγόνες) Αραιωτικό δείγματος από τη φιάλη σταγόνων στο σωληνάριο. Τοποθετήστε το δείγμα μπατονέτας ασθενούς στο Σωληνάριο. Τυλίξτε τη μπατονέτα τουλάχιστον 3 φορές ενώ πιέζετε την κεφαλή στο κάτω μέρος και στο πλάι του σωλήνα.	③ Τυλίξτε την κεφαλή της μπατονέτας στο εσωτερικό του σωλήνα καθώς την αφαιρείτε. Απορρίψτε το χρησιμοποιημένο μάκτρο στα απόβλητα βιολογικού κινδύνου.
④ Γεμίστε το παρεχόμενο Μικρό, διαυγές πλαστικό σταγονόμετρο μιας χρήσης με δείγμα ασθενούς από το σωληνάριο ή τοποθετήστε το καπάκι στο μπουκάλι με σταγονόμετρο.	⑤Ρίξτε 60-100 ul δείγματος (2-3 σταγόνες) στην κάρτα δοκιμής. ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Μην ρίχνετε δείγμα από το σωληνάριο.	⑥Διαβάστε το αποτέλεσμα στα 15 λεπτά. Το αποτέλεσμα ισχύει εντός 15-20 λεπτών. Πρέπει να επαναληφθεί

Ή

① δείγμα από ρινικά επιχρίσματα SARS-CoV-2, φαρυγγικά επιχρίσματα, πτύελα, βρογχοκυψελιδική, πλύση, υγρό.	②Σπάστε τον εσωτερικό πυρήνα ασφαλείας και πιέστε το υγρό στο κάτω μέρος του σωλήνα.	③ Πιέστε το άκρο μιας μπατονέτας για να αραιώσετε το δείγμα
④ Περιστροφή του σταλάκτη καλύμματος ουράς	⑤Σπιέστε περίπου 60-100 ul (2-3 σταγόνες) αραιωτικού δείγματος στην κάρτα αντιδραστηρίου	Διαβάστε το αποτέλεσμα στα 15 λεπτά. Το αποτέλεσμα ισχύει εντός 15-20 λεπτών. Πρέπει να επαναληφθεί

Ελεγχος ποιότητας
1. Η κάρτα δοκιμής περιλαμβάνει εσωτερικό διαδικαστικό έλεγχο. Αυτός ο έλεγχος επιβεβαιώνει ότι έχει εφαρμοστεί επαρκής όγκος δείγματος και τεχνική.
2. Τα πρότυπα ελέγχου δεν παρέχονται με αυτό το κιτ.
3. Συνιστάται η τήρηση της καλής εργαστηριακής πρακτικής, συμπεριλαμβανομένης της προσθήκης θετικών και αρνητικών μαρτύρων, προκειμένου να επαληθευτεί η σωστή απόδοση της δοκιμής.

ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΟΥ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΟΣ ΔΟΚΙΜΑΣΙΑΣ
1. Αρνητικό:
Εάν εμφανίζεται μόνο η γραμμή ποιοτικού ελέγχου C και οι γραμμές δοκιμής T δεν είναι κόκκινες, αυτό σημαίνει ότι δεν ανιχνεύεται αντιγόνο και το αποτέλεσμα είναι αρνητικό. Λόγω του περιορισμού της ευαισθησίας ανίχνευσης, αρνητικά αποτελέσματα μπορεί να προκληθούν από συγκεντρώσεις αντιγόνου χαμηλότερες από την αναλυτική ευαισθησία του προϊόντος.
2. Θετικά:
Εάν εμφανιστεί και η γραμμή ποιοτικού ελέγχου C και η γραμμή δοκιμής Τ, υποδηλώνει ότι ανιχνεύτηκε αντιγόνο. Τα δείγματα με θετικά αποτελέσματα θα πρέπει να επιβεβαιωθούν με εναλλακτική(ες) μέθοδο(ες) δοκιμής και κλινικά ευρήματα πριν από τη διάγνωση.
3. Μη έγκυρο:
Εάν δεν εμφανίζεται η γραμμή ποιοτικού ελέγχου C, το αποτέλεσμα της δοκιμής δεν είναι έγκυρο ανεξάρτητα από το αν υπάρχει κόκκινη γραμμή δοκιμής και θα πρέπει να ελεγχθεί ξανά.
Επαναλάβετε τη δοκιμή χρησιμοποιώντας δείγμα που απομένει ή νέο δείγμα, εάν τα αποτελέσματα δεν είναι καθαρά.
Εάν η επαναλαμβανόμενη δοκιμή δεν έχει αποτέλεσμα, διακόψτε τη χρήση του κιτ και επικοινωνήστε με τον κατασκευαστή.

ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ
Διασταυρούμενη Αντιδραστικότητα
Το κιτ ανίχνευσης αντιγόνου SARS-CoV-2 (ανοσοχρωματογραφία λατέξ) έχει δοκιμαστεί για αντιγόνο H1N1 της γρίπης A, αντιγόνο γρίπης Α H3N2, αντιγόνο γρίπης Β, αντιγόνο αδενοϊού, αντιγόνο μυκοπλάσματος, αντιγόνο αναπνευστικού συγκυτίου, αντιγόνο Staphylococcus pureusnenim θετικό. Τα αποτελέσματα δεν έδειξαν διασταυρούμενη αντιδραστικότητα.
Παρέμβαση
Προσθέστε μια ορισμένη συγκέντρωση παθογόνων στα κλινικά αρνητικά δείγματα και τα αποτελέσματα της δοκιμής δεν θα πρέπει να έχουν καμία αντίδραση παρεμβολής. Τα προστιθέμενα παθογόνα φαίνονται στον ακόλουθο πίνακα:

Περιορισμοί της δοκιμής
1. Αυτό το προϊόν προορίζεται μόνο για ποιοτική αξιολόγηση του αντιγόνου SARS-CoV-2.
2. Αυτή η δοκιμή παρέχεται μόνο για χρήση από κλινικά εργαστήρια ή σε εργαζόμενους στον τομέα της υγειονομικής περίθαλψης για δοκιμές στο σημείο της φροντίδας και όχι για κατ' οίκον δοκιμή.
3. Τα αποτελέσματα από τις δοκιμές αντιγόνων δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται ως η μοναδική βάση για τη διάγνωση ή τον αποκλεισμό της λοίμωξης SARS-CoV-2 ή για την ενημέρωση της κατάστασης μόλυνσης. Η διάγνωση θα πρέπει να επιβεβαιώνεται σε συνδυασμό με κλινικά συμπτώματα ή άλλες συμβατικές μεθόδους εξέτασης.
4. Τα αρνητικά αποτελέσματα δεν αποκλείουν τη μόλυνση από SARS-CoV-2, ιδιαίτερα σε όσους έχουν έρθει σε επαφή με τον ιό. Ο έλεγχος παρακολούθησης με μοριακό διαγνωστικό θα πρέπει να εξετάζεται για να αποκλειστεί η μόλυνση σε αυτά τα άτομα.
5. Μπορεί να προκύψει αρνητικό ή μη αντιδραστικό αποτέλεσμα εάν η ποσότητα του αντιγόνου για τον ιό SARS-CoV-2 που υπάρχει στο δείγμα είναι κάτω από το όριο ανίχνευσης της ανάλυσης.
6. Αυτό το τεστ μπορεί να ανιχνεύσει SARS-CoV και SARS-CoV-2 ανεξάρτητα από τον βιώσιμο (ζωντανό) ή μη βιώσιμο ιό. Η απόδοση του τεστ εξαρτάται από την ποσότητα του ιού (αντιγόνου) στο δείγμα, αλλά δεν συσχετίζεται απαραίτητα με τον τίτλο του αντιγόνου SARS-CoV-2 στο δείγμα.
7. Ένα αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής μπορεί να προκύψει εάν το επίπεδο του αντιγόνου είναι κάτω από το όριο ανίχνευσης ή εάν το δείγμα συλλέχθηκε ή μεταφέρθηκε ακατάλληλα.
8. Η μη τήρηση της διαδικασίας δοκιμής μπορεί να επηρεάσει αρνητικά την απόδοση της δοκιμής και/ή να ακυρώσει το αποτέλεσμα της δοκιμής.

βιβλιογραφικές αναφορές
1. Chaolin Huang, Yeming Wang, et al. Κλινικά χαρακτηριστικά ασθενών που μολύνθηκαν με νέο κοροναϊό του 2019 στη Γουχάν της Κίνας. The Lancet.2020;VOL395:497-506.
2. Zhu N, Zhang D, Wang W, Li X, Yang B, Song J, et αϊ. Ένας νέος κορωνοϊός από ασθενείς με πνευμονία στην Κίνα, 2019. 24 Ιανουαρίου 2020. New England Journal of Medicine.
3. Lamarre A, Talbot PJ. Επίδραση του pH και της θερμοκρασίας στη μολυσματικότητα του ανθρώπινου κοροναϊού 229E. Canadian Journal of Microbiology. 1989, 35(10):972-4.
4. Wang C, Horby PW, Hayden FG, Gao GF. Ένα νέο ξέσπασμα κορωνοϊού που προκαλεί παγκόσμια ανησυχία για την υγεία. Το Lancet. 24 Ιανουαρίου 2020.